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ライブイメージャー開発とエクソソーム測定

- Develpment of Live Imagers and Measurement of Exosomes -

我々の体は様々な細胞から構成され、それら細胞は種類ごとに異なる機能を有しております。一方、同じ種類の細胞であっても、細胞が配置された場所、老化度合い、病的状態によって、個々の細胞が発揮する能力に差が出るのみならず、機能そのものも変化します。これら細胞機能の質と量の変化は、細胞内のエネルギー代謝と密接に関わっており、エネルギー産生・消費機構を評価することは生体・細胞の状態を測定する新たな技術開発に繋がります。当研究室では、生体レベルと細胞レベルの双方でエネルギー代謝を解明することで、創薬標的の探索やスクリーニング技術の開発を行います。

 

              Our bodies are composed of numerous cells with diverse functions. Even if the cells share their fates, cellular functions in individual cells differ, depending on their locations within the body, aging, and pathological status, etc. These differences in cellular functions are closely related to cellular energy metabolism. Elucidation of the mechanisms underlying energy production and consumption could lead to the development of tools for drug discovery. To establish new methods, we are studying energy metabolism both in the whole body as well as individual cells.

 GIF-2250は細胞内のエンドソームを染色しますが、細胞外では

エクソソームを染色できます。緑がエクソソームです。赤もエクソ

​ソームの膜染色です。これらは、100nmの極微小小胞です。

エクソソームのような細胞外小胞のことをEVと呼びます。

Simple methods for measuring milk exosomes using fluorescent

compound GIF-2250/2276

Saho Furukawa, Kyoka Kawaguchi, Kotomi Chikama, Ryohei Yamada,

Yuji O. Kamatari, Lee Wah Lim, Hiroko Koyama, Yasuo Inoshima,

Mitsushi J. Ikemoto, Saishi Yoshida, Yoko Hirata,Kyoji Furuta,

Hiroshi Takemori

BBRC 2024: 149505

 

 

​新たなミトコンドリアラベル化剤(MitoMM)を開発しました。ライブイメージ・固定化後の抗体染色(界面活性化剤利用可)に利用できます。

 We have developed new mitochondrial imagers (MitoMM) that are able to use in living cells and fixed cells even in the presence of detergents.

 メラノサイトとケラチノサイトのうち、

ケラチノサイトのミトコンドリアをラベル

​し、メラノソームの送達を可視化しました。

 

 

 

 

LysoKK(GIF-2259)とMitoMMでマイトファジーを検出できます。

                     GIF-2250(緑)は、メラノソーム(黒)の分解を評価できます。

 

Intermittent inhibition of FYVE finger-containing phosphoinositide kinase induces melanosome degradation in B16F10 melanoma cells

Kawaguchi K, Watanabe M, Furukawa S, Koga K, Kanamori H, Ikemoto M, Takashima S, Maeda M, Oh-Hashi K, Hirata Y, Furuta K, Takemori H

Mol Bio Rep 2022 50: 5917-5930 

Visualization of mitophagy using LysoKK, a 7-nitro-2,1,3- benzoxadiazole-(arylpropyl)benzylamine derivative

Takemori HKoga KKawaguchi K, Furukawa S, Ito S, Imaishi J, Watanabe M, Maeda M, Mizoguchi M, Oh-Hashi K, Hirata Y, Furuta K

Mitochondrion 2022 62:176-180

The new live imagers MitoMM1/2 for mitochondrial visualization

Maeda M, Suzuki M, Takashima S, Sasaki T, Oh-Hashi K, Takemori H.

Biochem Biophys Res Commun 2021 562:50-54. doi: 10.1016/j.bbrc.2021.05.040.

Monitoring of Glutamate-Induced Excitotoxicity by Mitochondrial Oxygen Consumption.

Kumagai A, Sasaki T, Matsuoka K, Abe M, Tabata T, Itoh Y, Fuchino H, Wugangerile S, Suga M, Yamaguchi T, Kawahara H, Nagaoka Y, Kawabata K, Furue MK, Takemori H

Synapse. 2019 e22067

特願2021-012443 「化合物、細胞性小胞染色剤および細胞性小胞の蛍光染色方法」

竹森 洋、古田享史、森田洋子 出願人: 東海国立大学機構  2021/1/28 

 

 

 

 

 

 

 

 

Salt Inducible Kinases Are Critical Determinants of Female Fertility

Armouti M, Winston N, Hatano O, Hobeika E, Hirshfeld-Cytron J, Liebermann J, Takemori H, Stocco C.

Endocrinology. 2020 Apr 28:bqaa069. doi: 10.1210/endocr/bqaa069. 

 

Mouse Model of Metformin-Induced Diarrhea

Takemori h, Hamamoto A, Isogawa K Ito M, Takagi M Morino H, MIura T, Oshida K, Shibata T

BMJ Open Diabetes Res Care 2020 8: 1   DOI: 10.1136/bmjdrc-2019-000898

Inhibition of double-stranded RNA-dependent protein kinase prevents oxytosis and ferroptosis in mouse hippocampal HT22 cells.

Hirata Y, Iwasaki T, Makimura Y, Okajima S, Oh-Hashi K, Takemori H.

Toxicology. 2019 418: 1-10

A Simple Method for Labeling Human Embryonic Stem Cells Destined to Lose Undifferentiated Potency.

Kumagai A, Suga M, Yanagihara K, Itoh Y, Takemori H, Furue MK.

Stem Cells Transl Med. 2016 5 :275-81

 

Salt-inducible kinase 3 deficiency exacerbates lipopolysaccharide-induced endotoxin shock accompanied by increased levels of pro-inflammatory molecules in mice.

Sanosaka M, Fujimoto M, Ohkawara T, Nagatake T, Itoh Y, Kagawa M, Kumagai A, Fuchino H, Kunisawa J, Naka T, Takemori H.

Immunology. 2015 145:268-278.

 

Involvement of SIK3 in glucose and lipid homeostasis in mice.

Uebi T, Itoh Y, Hatano O, Kumagai A, Sanosaka M, Sasaki T, Sasagawa S, Doi J, Tatsumi K, Mitamura K, Morii E, Aozasa K, Kawamura T, Okumura M, Nakae J, Takikawa H, Fukusato T, Koura M, Nish M, Hamsten A, Silveira A, Bertorello AM, Kitagawa K, Nagaoka Y, Kawahara H, Tomonaga T, Naka T, Ikegawa S, Tsumaki N, Matsuda J, Takemori H.

PLoS One. 2012 7: e37803

 

SIK2 is a key regulator for neuronal survival after ischemia via TORC1-CREB.

Sasaki T, Takemori H, Yagita Y, Terasaki Y, Uebi T, Horike N, Takagi H, Susumu T, Teraoka H, Kusano K, Hatano O, Oyama N, Sugiyama Y, Sakoda S, Kitagawa K.

Neuron. 2011 69:106-119

 

Silencing the constitutive active transcription factor CREB by the LKB1-SIK signaling cascade.

Katoh Y, Takemori H, Lin XZ, Tamura M, Muraoka M, Satoh T, Tsuchiya Y, Min L, Doi J, Miyauchi A, Witters LA, Nakamura H, Okamoto M.

FEBS J. 2006 273: 2730-2748

 

The CREB coactivator TORC2 functions as a calcium- and cAMP-sensitive coincidence detector.

Screaton RA, Conkright MD, Katoh Y, Best JL, Canettieri G, Jeffries S, Guzman E, Niessen S, Yates JR 3rd, Takemori H, Okamoto M, Montminy M.

Cell. 2004 119:61-74.

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